ZEISS LSM 980 with Airyscan 2

LSM Plusでは、検出モードや蛍光領域に依存することなく、共焦点実験の質を簡単に高めることができます。線形ウィーナーフィルターデコンボリューションによって、人の手による調整がほとんど必要なく、信頼できる定量的結果を確保することができます。実績のあるAiryscanの超解像技術による処理と同様に、基本的な光学系特性の情報は、対物レンズ、屈折率および蛍光範囲に基づいて自動的に適応します。

LSM Plusは簡単に使用でき、下記の利点が得られます。

• 高速データ取得と低レーザー出力でSN比が向上 。低発現量のライブセルイメージングに特に有用
• 最大36チャンネルを1回でスキャン可能、スペクトルデータの解像度が向上 
• 明るい試料ではピンホールを閉じてより多くの空間情報 を取得し、分解能が向上
• LSM Plusの利点とAiryscanの超解像イメージングを組み合わせた統合ワークフロー 

_{脚注：ショウジョウバエの卵室、F-アクチン（ファロイジン）およびDE-カドヘリン（赤）で染色。ご提供：T. Jacobs, AG Luschnig, WWU MünsterおよびT. Zobel, Münster Imaging Network, Germany}

Airyscan 2は、環状に配置された32個の検出素子を有する領域検出器です。検出器全体では共焦点の標準設定を用いた場合よりも多くの光を集められると同時に、各素子が小さなピンホールとして機能して超解像情報を取得します。これにより、構造的な情報をより正確に捉えながら、光効率を大幅に向上させることができます。

スペクトル領域を近赤外（NIR）に広げ、より多くの標識を並行して使用できます。Quasar検出器とNIR検出器は、スペクトル多重化実験を効率的にサポートし、マルチカラー実験において、より多くの色素で様々な構造を可視化します。NIR蛍光標識は波長が長いため、生体試料に対する光毒性が低減され、光の影響を抑えながら試料をより長く観察できます。また、長い波長域の光は試料組織による散乱が少なく、組織深部への透過率が高くなります。

2チャンネルのNIR検出器は、2つの異なる検出器技術（extended red GaAsPとGaAs）を組み合わせ、900 nmまでの最適な感度を実現します。

大きく重なり合ったシグナルを分離したり、自家蛍光を除去するために、最大36基の検出器を用いて、ラムダスキャンを行うことができ、露光や所要時間を最小限に抑えることができます。LSM Plusで、Online Finger printingを含めた全波長域でのスペクトルイメージングを向上させます。

Hoechst（青）、Prox-1 Alexa488（緑）、好中球細胞：Ly-GFP、PECAM1 Dylight549（黄）、SMA Alexa568（橙）、VEGEF-R3 Alexa594（赤）、血小板：Dylight 649（マゼンタ）でマルチカラー標識したマウス精巣挙筋の一例。Online Finger printingを用いて32チャンネルGaAsP検出器で取得。

_{脚注：LSM Plus処理前後で向上したSN比の比較。ご提供：Dr. S. Volkery, MPI for Molecular Biomedicine, Münster, Germany}

多光子顕微鏡法（二光子顕微鏡法、非線形光学、NLO）は、特に神経科学において、生体試料または固定された試料の深部組織の非侵襲イメージングに適しています。多光子顕微鏡法は、長波長（600～1300 nm）の光は組織での吸収や散乱が少なく、試料の深部まで到達しながら焦点を結ぶという点を利用しています。蛍光色素を励起するために必要なエネルギーは、1つの光子ではなく、半分のエネルギーを持つ2つの光子によってもたらされます。2つの光子が同時に蛍光分子を励起する確率が十分高くなるのは、焦点位置のみです。そのため、蛍光は焦点面から発生し、効率よく検出でき、ピンホールを使わずとも光学セクションを生成できます。

_{脚注：二光子顕微鏡のエネルギー図}

レーザーのポイント照射、リニアスキャン、そしてフォトンカウンティングモードでシグナルを捉える検出器を組み合わせると、LSM 980は単なるイメージング装置以上の威力を発揮します。

• ラスター画像相関分光法（RICS）
• 蛍光相関分光法（FCS）
• 蛍光相互相関分光法（FCCS）
• フェルスター共鳴エネルギー移動（FRET）
• 光退色後蛍光回復（FRAP）
• 蛍光寿命イメージング顕微鏡法（FLIM）

_{脚注： 蛍光相関分光法（FCS）の原理。検出ボリュームを通過した蛍光粒子の軌道}