PALM MicroBeamのレーザーマイクロダイセクション

PALM MicroBeam

高純度で組織・細胞を回収するレーザーマイクロダイセクション

PALM MicroBeam

PALM MicroBeamは、凍結切片、ホルマリン固定パラフィン包埋材料、生きた植物などの天然組織、生細胞、染色体といった試料を、最も厳しい条件の試料であっても、特許プロセスを使ってコンタミネーションなしに捉えます。

レーザーマイクロダイセクション研究用の完全なワークフロー

PALM MicroBeamは、簡単かつコンタミネーションなしに原材料を分離します。結果を科学的に有意義なものにするには、均一な解析物質を得ることが必要です。PALM MicroBeam の正確な検知力とレーザーマイクロダイセクション技術、特許技術であるレーザー輸送技術が、これを可能にしています。

遺伝子発現パターンの解析は解析材料を正確に分離できるかにどうかにかかっているため、不要な細胞が含まれていると結果が変わってしまい、関連する細胞のシグナルを隠してしまう可能性があります。PALM MicroBeamは、細胞や組織の範囲を正確に定義できるようにすることによってこのような問題を防ぎ、正確で再現性のよい結果を保証しています。

特長

レーザーマイクロダイセクションから完全な研究プラットフォームまで

PALM MicroBeamは、高度なレーザーマイクロダイセクションを提供するように設計されています。ZEISSの特許技術は未来志向でアップグレードも可能です。主な特長は以下の通りです。

  • DNA、RNA、タンパク質の分離のためのマイクロダイセクションや解析に適切 — 保管されている試料と生細胞のどちらにも対応可能
  • レーザーマイクロダイセクションから統合イメージングワークステーションまで、すべてを完結するシステム
  • 凍結切片、ホルマリン固定パラフィン包埋組織に適用可能
  • ZEISSの試料回収の特許技術を利用しており、標準のスライドガラス(たとえば保管されている試料)からでもLCMの実行が可能
  • 蛍光、明視野、蛍光マルチチャンネル、拡張フォーカスなどのためにAxioCamシリーズのデジタルカメラを追加し拡張可能
  • 個々の実験から柔軟な回収装置を使った自動化まで、MicroBeamに追加コンポーネントを組み込んで簡単なワークフローを作成可能
  • 容易にMicroBeamを調整し、試料に最適なレーザーパラメータを設定できるキャリブレーション機能

テクノロジー

非接触、非コンタミネーションのレーザーカタパルト特許技術

PALM MicroBeamは集束レーザービームを使って、非接触で試料を切り離し、分離します。レーザカタパルト特許技術によって、対象の領域を高速かつコンタミネーションなしに分離できます。

高開口数の対物レンズを通して集束したエネルギーは、マイクロメートル以下の高精度です。まわりの組織に影響を与えることなく、細胞以下のレベルで操作を行うことができます。

PALM MicroBeamのレーザーパルスは、約1ナノ秒の間のみ照射されます。この短い時間では隣の組織に伝わる熱は無視できるので、生細胞の再培養ができるダメージの少ない分離が可能です。デリケートな幹細胞でさえ、活性や遺伝子構造を維持したまま分離することができます。

分子レベルの研究を最高の精密さで

DNAを解析する場合、原材料は注意深く選ぶ必要があります。感度の高い解析方法であっても、不要な物質を増幅させてしまうことがあります。また、わずかなコンタミネーションがあっても、結果が変わってしまうことがあります。個々の細胞で試験を行っているなら、1つの不要な細胞だけで、コンタミネーションエラーが100%になってしまいます。

PALM MicroBeamは、不均一組織から高純度の生体分子を、安全かつ高速に、再現性よく分離することによってこの問題を解決します。たとえば、高純度の腫瘍組織を分離し、正確で誤差がなく、再現性のよい変異分析を行うことができます。また、保管されている病理学や法医学の試料の調査も成功させることができます。他のレーザーマイクロダイセクション技術とは異なり、通常のスライドガラスを利用することも可能です。

遺伝子発現パターンの解析は解析材料を正確に分離できるかどうかにかかっているため、不要な細胞が含まれていると結果が変わってしまい、関連する細胞のシグナルを隠してしまう可能性があります。PALM MicroBeamは、細胞や組織の範囲を正確に定義できるようにすることによってこのような問題が起きることを防ぎ、正確で再現性のよい結果を保証しています。

発表文献

Publications

Including MicroBeam, CombiSystem & MicroTweezers
Download

Protocols of ZEISS Labs

The Unique Microdissection Service

LCM Protocols – Protein Handling for LC/MS
Non contact Laser Capture Microdissection - June 2011
(24 pages)
Download (7.630 kB)

PALM Protocols – RNA handling
Dos and Don’ts, slide preparation, archived samples, staining procedures, storage, laser microdissection procedure, collection devices and procedures. Downstream applications, RNA from FFPE and frozen sections, QIAGEN RNeasy FFPE kit, quality control, lab tips.
(28 pages)
Download (612 kB)

PALM Protocols – DNA handling
Preparation and treatment of slides, mounting samples onto slides, staining procedures, laser microdissection procedure, collection devices and procedures, cap check. Downstream applications, DNA from FFPE and frozen sections. QIAamp DNA procedure. PCR set up.
(26 pages)
Download (8.017 kB)

Chromosome Preparation
Chromosome preparation, staining, procedure of laser microdissection, collection procedures, collection onto AmpliGrid slide, consumables and components. Collection devices, lenses.
(20 pages)
Download (7.147 kB)

Cell Culture, non-contact Laser Capture Microdissection (LCM) and Recultivation
Cultivation of cells, coating of Dishes and Slides, improvement of visualization, procedure of laser microdissection, recultivation, time lapse, incubators. Optical Tweezers.
(14 pages)
Download (500 kB)

Immunofluorescence on frozen sections
Tips before starting, microtome cutting, antibody staining.
(5 pages)
Download (437 kB)

FISH Hybridization
Chromosome preparation. Preparation of chromosome paints. Hybridization of painting probes. Preparation of centromeric probes.
(15 pages)
Download (389 kB)

AutoLPC from glass slides results in good quality RNA
For RNA experiments on microdissected samples we usually recommend the use of MembraneSlides. Sometimes only old archived slides are available. We show that even this kind of slides is useful for RNA preparation. After removing the coverslip the unique and proprietary software function of “AutoLPC” allows quick access to the desired tissue area. And we could prove that this method does not influence the RNA quality.
(6 pages)
Download (2.287 kB)

RNA extraction from FFPE sections
Short protocol. Tips and recommendations for using FFPE sections as source for RNA extraction.
(4 pages)
Download (568 kB)

RNA extraction from frozen sections
Short protocol. Especially helpful for RNase rich tissue. Tips for microtome cutting and special staining (cresylviolet).
(4 pages)
Download (179 kB)